Bio-Seeq 手持式PCR生物戰(zhàn)劑檢測(cè)儀:
Bio-Seeq,臺(tái)應(yīng)用PCR 技術(shù)的便攜、手持式、thermocycler,能夠快速、精確檢測(cè)細(xì)菌和病毒的病原體的檢測(cè)儀?梢远ㄐ浴⒍糠治鰳悠,并可保存活體。
Bio-Seeq 手持式PCR生物戰(zhàn)劑檢測(cè)儀,并能夠在小于30 分鐘的時(shí)間內(nèi)檢測(cè)1CFU。小型,緊湊及牢固的設(shè)計(jì)使它成為的手持式生物戰(zhàn)劑檢測(cè)儀,并廣泛地應(yīng)用在國(guó)家安全和軍事中;具有超大的按鍵的隔膜鍵盤,了使用人員在佩帶厚重的防護(hù)手套時(shí)仍能方便的操作使用。
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ABI Ambion Am1005 一步法熒光定量RT-PCR試劑盒
ABI Am1005 AgPath-ID? One-Step RT-PCR Kit一步法熒光定量RT-PCR試劑盒
規(guī)格 100次
貨號(hào) AM1005
品牌 ABI Ambion Life Technologies
產(chǎn)品詳細(xì)描述
ABI AM 1005 AgPath-ID? One-Step RT-PCR Kit試劑盒——簡(jiǎn)便高效的RNA病源RT-PCR檢測(cè)試劑盒
特點(diǎn):
1)高靈敏,高特異的穩(wěn)定的RNA病源RT-PCR檢測(cè)試劑盒
2)簡(jiǎn)便快速,1小時(shí)內(nèi)可以獲得檢測(cè)結(jié)果
3)組分很少,反應(yīng)組裝方便
AgPath-ID? 一步法RT-PCR試劑盒利用一種快速單管實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR方法,可靈敏穩(wěn)定地?cái)U(kuò)增RNA靶點(diǎn)。
? 推薦用于RNA病原體擴(kuò)增
? 一致的RNA靶位擴(kuò)增,高特異性,高靈敏度
? 已經(jīng)過(guò)優(yōu)化,與靶位特異性引物和探針一同使用
? 含有ROX,可用于定量熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)化
AgPath-ID? AgPath-ID? 一步法 RT-PCR試劑配置用于快速簡(jiǎn)單地設(shè)置反應(yīng)。所有反應(yīng)集于一管,最大程度降低樣本處理錯(cuò)誤,縮短設(shè)置時(shí)間。組裝好之后,約1小時(shí)內(nèi)即可獲得結(jié)果。試劑盒中的RT-PCR酶混合液組分有高效的 ArrayScript? 逆轉(zhuǎn)錄酶、可提供高產(chǎn)量cDNA的突變MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶和用于特異性靶點(diǎn)擴(kuò)增的熱啟動(dòng)DNA聚合酶—AmpliTaq Gold? 聚合酶。2X RT-PCR緩沖液包含有優(yōu)化的試劑,用于高效穩(wěn)定地進(jìn)行的逆轉(zhuǎn)錄和PCR;緩沖液中還含有專利參比熒光ROX,用于定量熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)化。該試劑盒還提供了可選的檢測(cè)增強(qiáng)劑,可擴(kuò)增具有富GC區(qū)或頑固二級(jí)結(jié)構(gòu)的模板。
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北京冬璞泰和科技有限責(zé)任公司
聯(lián)系人:馬林
電話: 13716040241
QQ:1815596477
中文名稱:DPCR1蛋白抗體
英文名稱:DPCR1
產(chǎn)品編號(hào):RY-K9057
抗體規(guī)格:0.1ml/0.2ml
研究領(lǐng)域:腫瘤、細(xì)胞生物、染色質(zhì)和核信號(hào)、神經(jīng)生物學(xué)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期蛋白、線粒體
抗體來(lái)源:Rabbit
交叉反應(yīng):人, 小鼠, 大鼠, 雞, 犬, 豬, 牛, 兔 羊,
產(chǎn)品應(yīng):WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復(fù))
尚未在其他應(yīng)用程序中測(cè)試。
最佳稀釋度/濃度應(yīng)該由最終用戶確定。
分 子 量:57kDa
細(xì)胞定位:細(xì)胞核 細(xì)胞漿 線粒體
性 狀:凍干或液體
濃 度:1mg/1ml
免 疫 原: KLH結(jié)合來(lái)自人AIF蛋白合成肽
亞 型:IgG
純化方法:affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件存儲(chǔ):在- 20°C為一年。避免重復(fù)凍融循環(huán)。凍干抗體穩(wěn)定在至少一個(gè)月室溫超過(guò)一年保持在20°當(dāng)用無(wú)菌PBS pH 7.4緩沖或稀釋的抗體抗體穩(wěn)定至少兩周在2-4°C.
生 產(chǎn) 商:上海潤(rùn)裕生物科技有限公司
抗體溶解方法:
方法一:我們的抗體(凍干粉)已經(jīng)包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐劑(疊氮鈉或慶大霉素),您只需要加入滅菌的雙蒸水就行了?贵w溶解后,置于-20℃保存,最好分裝后使用,避免反復(fù)凍融,可保證至少1年有效;
方法二:也可以只加入一半體積的雙蒸水,再用一半體積的甘油補(bǔ)足,置于-20℃保存,這樣抗體不會(huì)凍,有利于抗體的穩(wěn)定。
后續(xù)試驗(yàn)時(shí),再使用對(duì)應(yīng)的緩沖液稀釋成工作液,即用即配。
我們的抗體(凍干粉),在常溫放置下,至少一個(gè)月有效;若在-20℃下保存(推薦),至少三年有效。
抗體修復(fù)方式:
修復(fù)液:0.01M 枸櫞酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
抗體修復(fù)方法:
方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫;
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,;3min,中火5min,自然冷卻至室溫。
DPCR1蛋白抗體等相關(guān)抗體如下:
RY-K4176英文名稱:SLC29A4中文名稱:腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體
RY-K4775英文名稱:KCNMA1/BK channel中文名稱:鈣激活鉀通道蛋白α1抗體
RY-K13446英文名稱:Phospho-Glycogen synthase 1(Ser645)中文名稱:磷酸化葡萄糖合成酶1抗體
RY-K7442英文名稱:TGIF2中文名稱:TGF-β誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子2抗體
RY-K18991英文名稱:NAALAD2中文名稱:NAALAD2蛋白抗體
RY-K12242英文名稱:ZNF473中文名稱:鋅指蛋白473抗體
RY-K8287英文名稱:Dihydropyrimidinase中文名稱:二氫嘧啶抗體
RY-K5269英文名稱:phospho-CREB-1(Ser142)中文名稱:磷酸化CREB-1抗體
RY-K9897英文名稱:Glycoprotein VI中文名稱:糖蛋白VI/六糖蛋白抗體
RY-K3997英文名稱:SLC25A10中文名稱:線粒體二羧酸載體蛋白抗體
RY-K7770英文名稱:10-Sep中文名稱:細(xì)胞分化蛋白SEPT10抗體
RY-K2460英文名稱:IL-13Ra1中文名稱:白細(xì)胞介素-13受體a1抗體
RY-K20656英文名稱:CDKN2A/p16-INK4a中文名稱:抑癌基因p16抗體
RY-K11620英文名稱:RGS21中文名稱:G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白21抗體
RY-K16589英文名稱:TRAPPC9中文名稱:Nibp蛋白抗體
RY-K1848英文名稱:alpha MSH中文名稱:促黑細(xì)胞激素α抗體
RY-K9382英文名稱:ZFP103中文名稱:鋅指蛋白103抗體
RY-K9406英文名稱:CT135/ODF3中文名稱:腫瘤/睪丸抗原135抗體
RY-K3904英文名稱:HSD11B1中文名稱:羥基類固醇脫氫酶11β1抗體
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小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 ELISA Kit市場(chǎng)價(jià)格,sEPCR ELISA Kit檢測(cè)原理 現(xiàn)貨
試劑的準(zhǔn)備 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。 洗板方法小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 ELISA Kit市場(chǎng)價(jià)格,sEPCR ELISA Kit檢測(cè)原理 現(xiàn)貨1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin elisa試劑盒檢測(cè)價(jià)格,GHRP-Ghrelin ELISA Kit北京 小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 Mouse growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit 小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelinEelisa試劑盒價(jià)格,GHRP-Ghrelin ELISA試劑盒說(shuō)明書,實(shí)驗(yàn)代測(cè) 小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 ELISA試劑盒檢測(cè)價(jià)格,Hpt/HP ELISA Kit北京 小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 Mouse Haptoglobin,Hpt/HP ELISA KIT 小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Eelisa試劑盒價(jià)格,Hpt/HP ELISA試劑盒說(shuō)明書,實(shí)驗(yàn)代測(cè)小鼠熱休克因子1 ELISA試劑盒檢測(cè)價(jià)格,HSF1 ELISA Kit北京 小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit 小鼠熱休克因子1Eelisa試劑盒價(jià)格,HSF1 ELISA試劑盒說(shuō)明書,實(shí)驗(yàn)代測(cè)小鼠熱休克蛋白40 ELISA試劑盒檢測(cè)小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 ELISA Kit市場(chǎng)價(jià)格,sEPCR ELISA Kit檢測(cè)原理 現(xiàn)貨價(jià)格,Hsp-40 ELISA Kit北京 小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 40,Hsp-40 ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白40Eelisa試劑盒價(jià)格,Hsp-40 ELISA試劑盒說(shuō)明書,實(shí)驗(yàn)代測(cè)小鼠熱休克蛋白60 ELISA試劑盒檢測(cè)價(jià)格,Hsp-60 ELISA Kit北京 小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 Mouse heat shock protein 60,hSP-60 ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白60Eelisa試劑盒價(jià)格,Hsp-60 ELISA試劑盒說(shuō)明書,實(shí)驗(yàn)代測(cè)小鼠熱休克蛋白70 ELISA試劑盒檢測(cè)價(jià)格,HSP-70 ELISA Kit北京 小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 70,Hsp-70 ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白70Eelisa試劑盒價(jià)格,HSP-70 ELISA試劑盒說(shuō)明書,實(shí)驗(yàn)代測(cè)小鼠熱休克蛋白90 ELISA試劑盒檢測(cè)價(jià)格,HSP-90 ELISA Kit北京 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein 90,Hsp-90 ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白90Eelisa試劑盒價(jià)格,HSP-90 ELISA試劑盒說(shuō)明書,實(shí)驗(yàn)代測(cè)小鼠熱休克蛋白糖蛋白96 ELISA試劑盒檢測(cè)價(jià)格,HSP gp96 ELISA Kit北京 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96Eelisa試劑盒價(jià)格,HSP gp96 ELISA試劑盒說(shuō)明書,實(shí)驗(yàn)代測(cè)小鼠幽門螺旋菌IgG ELISA試劑盒檢測(cè)價(jià)格,Hp-IgG ELISA Kit北京 小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 Mouse Helicobacter pylori IgG,Hp-IgG ELISA Kit 小鼠幽門螺旋菌IgGEelisa試劑盒價(jià)格,Hp-IgG ELISA試劑盒說(shuō)明書,實(shí)驗(yàn)代測(cè)
產(chǎn)品名稱:小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
聯(lián)系電話135 6451 5386 QQ 1161399267 余先生
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測(cè)方法: ELISA酶聯(lián)免疫法
說(shuō) 明 書:隨貨發(fā)送,也可直接聯(lián)系在線銷售索取
測(cè)試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
試劑盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6個(gè)月。
產(chǎn)品產(chǎn)地:進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
產(chǎn)品庫(kù)存:
品牌:自主研發(fā)/進(jìn)口原裝
產(chǎn)品價(jià)格:價(jià)格優(yōu)惠,歡迎來(lái)電洽談!
試劑盒使用范圍:僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.
產(chǎn)品價(jià)格:價(jià)格優(yōu)惠,歡迎來(lái)電洽談!
ELISA試劑盒定性定量檢測(cè)一步到位,可同時(shí)大批量完成多種屬的檢測(cè)工作,而且一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,正規(guī)專業(yè)的我們,一定能幫您,將實(shí)驗(yàn)做得更好,更精確。試驗(yàn)過(guò)程中,如有任何疑問(wèn)都可和我們聯(lián)系,無(wú)論是售前、售中、售后我們都將始終如一,將優(yōu)質(zhì)服務(wù)進(jìn)行到底本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中酸性磷酸酶(ACP)含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠酸性磷酸酶(ACP)水平。用純化的小鼠酸性磷酸酶(ACP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入酸性磷酸酶(ACP),再與HRP標(biāo)記的酸性磷酸酶(ACP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的酸性磷酸酶(ACP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠酸性磷酸酶(ACP)濃度。小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒組成:試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存說(shuō)明書 1份 1份 封板膜 2片(48) 2片(96) 密封袋 1個(gè) 1個(gè) 酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:720ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存酶標(biāo)試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒樣本處理及要求:1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為 詳見說(shuō)明書(業(yè)務(wù)人員可提供))。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。計(jì)算: 以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo), 在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋 倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo) 準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值 代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋 倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度! 。ù藞D僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為 (詳見說(shuō)明書)以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于(詳見說(shuō)明書) 檢測(cè)范圍: 詳見說(shuō)明書(業(yè)務(wù)人員可提供) 保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月
關(guān)于ELISA試劑盒
ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。
ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。
Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。
免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。近年來(lái),隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。
HBsAg試劑特點(diǎn)(檢測(cè)模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對(duì)抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點(diǎn)的鼠復(fù)合單位,可測(cè)得HBsAg變異樣品,提高檢測(cè)的特異性(99.98%)提高檢測(cè)的靈敏度,應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說(shuō)(PEI)HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對(duì)ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml
ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來(lái)自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與第一次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。
LISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
特點(diǎn):一、高效、靈敏、特異的抗體; 二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體; 四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型; 五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L,取100mL被測(cè)水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為2.98mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
10. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
11. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
12. 按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
elisa試劑盒測(cè)試要求
做好對(duì)照
正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
實(shí)驗(yàn)條件的選擇
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。
試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測(cè),避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。
檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大
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